材料与方法
材料与试剂
海蜇皮 (食用级):某水产市场;乙酸(36%,分析纯)、羟脯氨酸试剂盒:上海阿拉丁生化科技股份有限公 司;胃蛋白酶(≥3000U/mg):上海麦克林生化科技股份有限公司;透析袋:上海源叶生物科技有限公司。
仪器与设备
Scientz-IID超声波细胞粉碎机 宁波新芝生物科技股份有限公司;FreeZone 2.5L真空冷冻干燥机 美国Labconco公司;UV-2550紫外可见分光光度计岛津仪器(苏州)有限公司;L-8900全自动氨基酸分析仪日立高新技术有限公司;8H-3数显磁力加热搅拌器 锦州药业(集 团)器化玻有限公司;Scimitar2000傅里叶变换红外光谱仪 美国安捷伦公司;MS105DU电子分析天平梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;ThermoX1R 高速冷冻离心机 美国 Thermo Fisher Scientific公司。
实验方法
海蜇皮前处理将盐渍海蜇皮用自来水反复冲洗,冲洗后的海蜇皮浸泡在超纯水中12h,每3h换一次水,将超纯水浸泡后的海蜇皮沥干水分,放入密封袋中置于4℃冰箱中备用。将脱盐处理后的海蜇皮放入0.1mol/LNaOH溶液中,用磁力搅拌器缓慢搅拌3d,搅拌过程中每8h更换一次氢氧化钠溶液,之后将海蜇皮捞出,用蒸馏水反复清洗至中性,切分成2cmx2cmx0.5cm大小方块后沥干备用。
将上述处理后的海蜇皮浸泡在0.5mol/L乙酸溶液中,料液比为1:1,加入一定量胃蛋白酶进行消解后离心,以10000r/min离心20min(4℃),随后将上清液装入透析袋中,于0.2mol/LNaHPO4溶液中进行透析,透析液的量为透析袋内溶液体积的15~20倍,透析过程中每6h更换一次透析液,透析3d后 以10000r/min 离心,弃上清液,将沉淀复溶于0.5mol/L乙酸溶液中,冻干后于-80℃冰箱中保存